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產品名稱：MMLV逆轉錄酶/ MMLV Reverse Transcriptase (RNase H-)
產品濃度：200U/μl
貯存條件：-20℃保存，有效期二年。
產品說明：逆轉錄酶能以RNA或單鏈DNA為模板起始合成互補的DNA鏈。MMLV Reverse Transcriptase (RNase H-)是M-MLV逆轉錄酶的多點突變型，點突變去除了RNase H的活性中心，使RNase H的活性降低，減少了逆轉錄反應中RNA的降解，并提高了酶的耐熱能力，50℃反轉錄時，保持了100%活性；更容易打開模板的高級結構，使cDNA第一鏈的得率增加，更容易獲得全長cDNA。
來源：E.coli 菌株，含有突變型莫洛尼氏鼠白血病病毒（M-MLV）逆轉錄酶基因。
活性定義：以Poly(A)為模板，Oligo (dT)為引物，在37℃條件下，10分鐘內催化摻入1nmol的dTTP所需酶量定義一一個活性單位(U)。
產品應用：第一鏈cDNA的合成；RT-PCR反應。
儲存緩沖液：20 mM Tris-HCl (pH7.5)，200 mM NaCl，0.25 mM EDTA，0.01% NP-40(v/v)，2.5 mM DTT，50%甘油(v/v)。
產品純度： 200U的本酶和1μg的16S、23S rRNA在37℃下孵育1h，電泳條帶無肉眼可見的變化。
反應緩沖液：[5×RT Buffer] 250mM Tris-HCl (pH 8.3)，15mM MgCl2，375 mM KCl，50mM DTT。
推薦的反應條件：
cDNA第一鏈的合成
1) 在無RNase的PCR管中加入：Oligo dT12-18 (1μg/μl)或基因特異引物2-10pmol或隨機引物(50-250ng)1μl；Total RNA (10ng-5μg)或mRNA(1-500ng)xμl；dNTP (10mM each)1μl；DEPC ddOH2 (14-x)μl。
2) 70℃保溫10分鐘后迅速冰浴2-10分鐘。
3) 離心數秒使反應液聚集于PCR管底部。
4) 向上述反應液中加入：5×RT Buffer 4μl；RNasin (40U/μl) 1μl；輕輕吸打混勻。
5) 50℃保溫2分鐘（Oligo dT12-18或基因特異引物）；如果是隨機引物則25℃保溫10分鐘。
6) 加入1μl MMLV逆轉錄酶，混勻后50℃保溫50分鐘。
7) 70℃ 保溫15分鐘后置冰上冷卻，得到cDNA。該產物可直接用于第二鏈的合成或RT- PCR擴增反應，保存請置于-20℃。
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